(19) 대한민국특허청(KR)
(12) 공개특허공보(A)
(11) 공개번호 10-2016-0145790
(43) 공개일자 2016년12월20일
(51) 국제특허분류(Int. Cl.)
A61K 47/48 (2006.01)
(52) CPC특허분류
A61K 47/48715 (2013.01)
A61K 47/48338 (2013.01)
(21) 출원번호 10-2016-7032502
(22) 출원일자(국제) 2015년04월21일
심사청구일자 2016년11월22일
(85) 번역문제출일자 2016년11월22일
(86) 국제출원번호 PCT/IB2015/052918
(87) 국제공개번호 WO 2015/162563
국제공개일자 2015년10월29일
(30) 우선권주장
61/984,645 2014년04월25일 미국(US)
(뒷면에 계속)
(71) 출원인
리나트 뉴로사이언스 코프.
미국 캘리포니아 94080 사우스 샌프란시스코 이스
트 그랜드 애비뉴 230
화이자 인코포레이티드
미국 뉴욕주 10017 뉴욕 이스트 42번 스트리트
235
(72) 발명자
스토롭, 파벨
미국 94403 캘리포니아주 샌 마티오 투엔티피프쓰
애비뉴 웨스트 461
델라리아, 캐서린 앤
미국 94598 캘리포니아주 월넛 크릭 포말 웨이
1896
(뒷면에 계속)
(74) 대리인
양영준, 김영
전체 청구항 수 : 총 32 항
(54) 발명의 명칭 약물이 고도로 로딩된 항체-약물 접합체
(57) 요 약
본 발명은 1) 글루타민-함유 태그, 내인성 글루타민, 및/또는 항체 조작 또는 조작된 트랜스글루타미나제 (예를
들어, 기질 특이성이 변경됨)에 의해 반응성이게 만들어진 내인성 글루타민; 및 2) 아민 공여체 단위, 링커, 및
작용제 모이어티를 포함하는 아민 공여체 작용제를 포함하는, 항체-약물 비 (DAR)가 높은 트랜스글루타미나제-매
개 항체-약물 접합체로서, DAR이 적어도 약 5인 항체-약물 접합체를 제공한다. 본 발명은 이같은 더 고도로 약
물이 로딩된 항체-약물 접합체의 제조 방법 및 사용 방법을 또한 제공한다.
대 표 도 - 도1
공개특허 10-2016-0145790
- 1 -
(52) CPC특허분류
A61K 47/48384 (2013.01)
A61K 47/48561 (2013.01)
A61K 47/48569 (2013.01)
(72) 발명자
도리왈스카, 막달레나
미국 94061 캘리포니아주 레드우드 시티 크롬프턴
로드 1293
폴레티, 다비드 루치아노
미국 94025 캘리포니아주 멘로 파크 포틴쓰 애비뉴
847
두쉰, 루쎌 조지
미국 06371 코네티컷주 올드 라임 제리코 드라이브
15
쉘톤, 데이비드 루이스
미국 94618 캘리포니아주 오클랜드 클로버 드라이
브 5845
라즈팔, 아르빈드
미국 94127 캘리포니아주 샌프란시스코 포에스터
스트리트 519
(30) 우선권주장
62/028,731 2014년07월24일 미국(US)
62/103,999 2015년01월15일 미국(US)
62/147,293 2015년04월14일 미국(US)
공개특허 10-2016-0145790
- 2 -
명 세 서
청구범위
청구항 1
식: 항체-(T-(X-Y-Za)b)c를 포함하는 항체-약물 접합체이며,
여기서, T는 1) 특이적 부위에서 조작된 글루타민-함유 태그, 2) 내인성 글루타민, 및/또는 3) 항체 조작 또는
조작된 트랜스글루타미나제에 의해 반응성이게 만들어진 내인성 글루타민이고;
X는 아민 공여체 단위이고; Y는 링커이며; Z는 작용제 모이어티이고;
X-Y-Z는 글루타민-함유 태그, 내인성 글루타민, 및/또는 반응성 내인성 글루타민에 부위-특이적으로 접합된 아
민 공여체 작용제이고;
a는 1 내지 6의 정수이고;
b는 1 내지 6의 정수이고;
c는 1 내지 20의 정수이며;
a, b, 및 c의 곱 (약물-항체 비)은 적어도 약 5인, 항체-약물 접합체.
청구항 2
제1항에 있어서, 항체가 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 인간 항체, 인간화 항체, 키메라 항체, 이중특이적
항체, 미니바디(minibody), 디아바디(diabody), 또는 항체 단편인 접합체.
청구항 3
제1항 또는 제2항에 있어서, T가 적어도 1개의 내인성 글루타민 또는 반응성 내인성 글루타민을 포함하는 것인
접합체.
청구항 4
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 반응성 내인성 글루타민이 탈글리코실화에 의해 또는 항체 내의 또
다른 아미노산의 아미노산 변형에 의해 반응성이게 만들어진 것인 접합체.
청구항 5
제4항에 있어서, 또 다른 아미노산 변형이 위치 297 (EU 넘버링 체계)에서의 치환인 접합체.
청구항 6
제5항에 있어서, 치환이 위치 297에서의 아스파라긴 (N)에서 글루타민 (Q)으로의 치환 또는 N에서 알라닌 (A)으
로의 치환인 접합체.
청구항 7
제5항에 있어서, 항체가 위치 K222, K340, 및/또는 K370에서의 제2 아미노산 변형을 추가로 포함하는 것인 접합
체.
청구항 8
제7항에 있어서, 제2 아미노산 변형이 리신에서 아르기닌으로의 치환인 접합체.
청구항 9
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 아민 공여체 작용제가 1) 경쇄, 중쇄, 또는 경쇄 및 중쇄 양쪽 모두
중 어느 것의 카르복실 말단; 2) 경쇄, 중쇄, 또는 경쇄 및 중쇄 양쪽 모두 중 어느 것의 아미노 말단; 및 3)
공개특허 10-2016-0145790
- 3 -
글루타민-함유 태그가 항체 내에 삽입되거나 또는 항체 내의 하나 이상의 내인성 아미노산을 교체하는,
위치(들) S60-R61, R108, T135, S160, S168, S190-S192, P189-S192, G200-S202, K222-T225, K222-T223, T223,
L251-S254, M252-I253, E294-N297, E293-N297, N297, 및/또는 G385로 이루어진 군으로부터 선택된 항체의 적어
도 하나 이상의 위치에서의 글루타민-함유 태그에 부위-특이적으로 접합된 것인 접합체.
청구항 10
제8항에 있어서,
a) 아민 공여체 작용제가 위치 295의 내인성 글루타민 및 위치 297의 치환된 글루타민에 부위-특이적으로 접합
되는, 위치 N297Q 및 K222R에서의 아미노산 치환; 및
b) 아민 공여체 작용제가 항체의 경쇄의 카르복실 말단의 글루타민-함유 태그(들)에 부위-특이적으로 접합되는,
하나 이상의 글루타민-함유 태그
를 포함하고, 약물-항체 비가 약 5-7인 접합체.
청구항 11
제10항에 있어서, 아민 공여체 작용제가, 글루타민-함유 태그가 항체 내에 삽입되거나 또는 항체 내의 하나 이
상의 내인성 아미노산을 교체하는 S60-R61, R108, T135, S160, S168, S190-S192, P189-S192, G200-S202, K222-
T225, K222-T223, T223, L251-S254, M252-I253, E294-N297, E293-N297, N297, 및 G385로 이루어진 군으로부터
선택된 하나 이상의 위치에서의 글루타민-함유 태그에 추가로 부위-특이적으로 접합되고, 약물-항체 비가 적어
도 약 6인 접합체.
청구항 12
제10항에 있어서, 아민 공여체 작용제가 항체의 중쇄의 카르복실 말단의 글루타민-함유 태그에 추가로 부위-특
이적으로 접합되고, 약물-항체 비가 약 6-9인 접합체.
청구항 13
제10항에 있어서, 아민 공여체 작용제가 항체 중쇄 내의 아미노산 위치 T135 뒤에 삽입된 글루타민-함유 태그에
추가로 부위-특이적으로 접합되고, 약물-항체 비가 약 6-9인 접합체.
청구항 14
제10항 또는 제13항에 있어서, 아민 공여체 작용제가, 내인성 아미노산 잔기가 글루타민-함유 태그로 교체되는
항체 경쇄 내의 아미노산 위치 G200-S202의 글루타민-함유 태그에 추가로 부위-특이적으로 접합되고, 약물-항체
비가 약 6-11인 접합체.
청구항 15
제8항에 있어서, 아민 공여체 작용제가
a) 항체의 경쇄의 카르복실 말단;
b) 항체 중쇄 내의 아미노산 위치 T135 뒤; 및
c) 내인성 아미노산 잔기가 글루타민-함유 태그로 교체되는 항체 경쇄 내의 아미노산 위치 G200-S202
의 글루타민-함유 태그에 부위-특이적으로 접합되고,
약물-항체 비가 약 5-7인 접합체.
청구항 16
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 글루타민-함유 태그가 Q, LQG, LLQGG (서열식별번호(SEQ ID NO):
1), LLQG (서열식별번호: 2), LSLSQG (서열식별번호: 3), GGGLLQGG (서열식별번호: 4), GLLQG (서열식별번호:
5), LLQ, GSPLAQSHGG (서열식별번호: 6), GLLQGGG (서열식별번호: 7), GLLQGG (서열식별번호: 8), GLLQ (서열
식별번호: 9), LLQLLQGA (서열식별번호: 10), LLQGA (서열식별번호: 11), LLQYQGA (서열식별번호: 12), LLQGSG
(서열식별번호: 13), LLQYQG (서열식별번호: 14), LLQLLQG (서열식별번호: 15), SLLQG (서열식별번호: 16),
공개특허 10-2016-0145790
- 4 -
LLQLQ (서열식별번호: 17), LLQLLQ (서열식별번호: 18), LLQGR (서열식별번호: 19), LLQGPP (서열식별번호:
20), LLQGPA (서열식별번호: 21), GGLLQGPP (서열식별번호: 22), GGLLQGA (서열식별번호: 23), LLQGPGK (서열
식별번호: 25), LLQGPG (서열식별번호: 26), LLQGP (서열식별번호: 27), LLQP (서열식별번호: 28), LLQPGK (서
열식별번호: 29), LLQAPGK (서열식별번호: 30), LLQGAPG (서열식별번호: 31), LLQGAP (서열식별번호: 32), 및
LLQLQG (서열식별번호: 36)로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 것인 접합체.
청구항 17
제16항에 있어서, 글루타민-함유 태그가 LLQGA (서열식별번호: 11), LQG, GGLLQGA (서열식별번호: 23), LLQGPA
(서열식별번호: 21), LLQGPP (서열식별번호: 20), GGLLQGPP (서열식별번호: 22), LLQGSG (서열식별번호: 13),
LLQG (서열식별번호: 2), LLQYQG (서열식별번호: 14), LLQLLQG (서열식별번호: 15), LLQLQG (서열식별번호:
36), LLQLLQ (서열식별번호: 18), LLQLQ (서열식별번호: 17), LLQGR (서열식별번호: 19), LLQYQGA (서열식별번
호: 12), SLLQG (서열식별번호: 16), 또는 LLQLLQGA (서열식별번호: 10)인 접합체.
청구항 18
제1항에 있어서, 아민 공여체 단위-링커 (X-Y)가 선형 또는 분지형인 접합체.
청구항 19
제18항에 있어서, 아민 공여체 단위-링커 (X-Y)가 Ac-Lys-Gly (아세틸-리신-글리신), 아미노카프로산, Ac-
Lys-β-Ala (아세틸-리신-β-알라닌), 아미노-PEG2 (폴리에틸렌 글리콜)-C2, 아미노-PEG3-C2, 아미노-PEG6-C2,
Ac-Lys-Val-Cit-PABC (아세틸-리신-발린-시트룰린-p-아미노벤질옥시카르보닐), 아미노-PEG6-C2-Val-Cit-PABC,
아미노-PEG3-C2-Val-Cit-PABC, 아미노카프로일-Val-Cit-PABC, [(3R,5R)-1-{3-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]프로
파노일}피페리딘-3,5-디일]비스-Val-Cit-PABC, [(3S,5S)-1-{3-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]프로파노일}피페리딘
-3,5-디일]비스-Val-Cit-PABC, 푸트레신, 및 Ac-Lys-푸트레신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 접합체.
청구항 20
제1항에 있어서, 작용제 모이어티가 세포독성제인 접합체.
청구항 21
제20항에 있어서, 세포독성제가 안트라시클린, 오리스타틴, 캄프토테신, 콤브레타스타틴, 돌라스타틴, 듀오카르
마이신, 엔다이인, 겔다나마이신, 인돌리노-벤조디아제핀 이량체, 메이탄신, 퓨로마이신, 피롤로벤조디아제핀
이량체, 탁산, 빈카 알칼로이드, 튜불리신, 헤미아스테를린, 스플라이세오스타틴, 플라디에놀리드, 및 이들의
입체이성질체, 동배체, 유사체 또는 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 접합체.
청구항 22
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 아민 공여체 작용제가 알렉사(Alexa) 488 카다베린, 5-FITC 카다베
린, 알렉사 647 카다베린, 알렉사 350 카다베린, 5-TAMRA 카다베린, 5-FAM 카다베린, SR101 카다베린, 5,6-
TAMRA 카다베린, 5-FAM 리신, Ac-LysGly-MMAD, 아미노-PEG3-C2-MMAD, 아미노-PEG6-C2-MMAD, 아미노-PEG3-C2-아
미노-노나노일-MMAD, 아미노카프로일-Val-Cit-PABC-MMAD, 아미노-PEG3-C2-Val-Cit-PABC-MMAD, 아미노-PEG6-C2-
Val-Cit-PABC-MMAD, Ac-Lys-Val-Cit-PABC-MMAD, 아미노카프로일-MMAD, Ac-Lys-β-Ala-MMAD, 아미노-PEG2-C2-
MMAE, 아미노카프로일-MMAE, 아미노-PEG3-C2-MMAE, 아미노카프로일-MMAF, 아미노카프로일-Val-Cit-PABC-MMAE,
아미노-PEG-6-C2-Val-Cit-PABC-MMAE, Ac-Lys-Val-Cit-PABC-MMAE, 아미노카프로일-Val-Cit-PABC-MMAF, 아미노-
PEG-6-C2-Val-Cit-PABC-MMAF, Ac-Lys-Val-Cit-PABC-MMAF, 아미노-PEG6-C2-Val-Cit-PABC-0101, Ac-Lys-Val-
Cit-PABC-0101, 푸트레시닐-겔다나마이신, Ac-Lys-푸트레시닐-겔다나마이신, 아미노카프로일-3377, 아미노-
PEG6-C2-3377, 아미노카프로일-0131, 아미노-PEG6-C2-0131, 아미노카프로일-0121, 아미노-PEG6-C2-0121,
[(3R,5R)-1-{3-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]프로파노일}피페리딘-3,5-디일]비스-Val-Cit-PABC-MMAD, [(3R,5R)-
1-{3-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]프로파노일}피페리딘-3,5-디일]비스-Val-Cit-PABC-MMAE, 2-아미노에톡시-
PEG6-NODAGA, 및 N-2-아세틸-L-리실-L-발릴-N~5~-카르바모일-N-[4-({[(2-{[(3R,5S,7R,8R)-8-히드록시-7-
{(1E,3E)-5-[(2S,3S,5R,6R)-5-{[(2Z,4S)-4-히드록시펜트-2-에노일]아미노}-3,6-디메틸테트라히드로-2H-피란-
2-일]-3-메틸펜타-1,3-디엔-1-일}-1,6-디옥사스피로[2.5]옥트-5-일]아세틸}히드라지닐)카르보닐]옥시}메틸)페
닐]-L-오르니틴아미드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 접합체.
공개특허 10-2016-0145790
- 5 -
청구항 23
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 접합체 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
청구항 24
평균 약물-항체 비가 적어도 약 5.0인, 다수의 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 접합체를 포함하는 제약 조
성물.
청구항 25
적어도 하나의 항체-약물 접합체가 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항의 접합체이고, 평균 약물-항체 비가 적어
도 약 4.1인 다수의 항체-약물 접합체를 포함하는 제약 조성물.
청구항 26
유효량의 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항의 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 암 치료를
필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법.
청구항 27
유효량의 제23항 내지 제25항 중 어느 한 항의 제약 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 종양 성장
또는 진행의 억제를 필요로 하는 대상체에서 종양 성장 또는 진행을 억제하는 방법.
청구항 28
a) 접합체와 암-관련 단백질의 결합을 초래하는 조건 하에 대상체의 샘플을 제1항의 접합체와 접촉시키는 단계,
및 b) 암-관련 단백질에 대한 접합체의 결합을 결정하는 단계를 포함하는, 암을 앓고 있는 것으로 추정되는 대
상체에서 암을 진단하는 방법.
청구항 29
a) 항체 및 글루타민-함유 태그, 및/또는 내인성 및/또는 반응성 내인성 글루타민이 있는 항체를 포함하는 항체
-T 분자를 제공하는 단계;
b) 트랜스글루타미나제의 존재 하에 아민 공여체 작용제를 항체-T 분자와 접촉시키는 단계; 및
c) 항체-T가 아민 공여체 작용제에 공유결합으로 연결되게 하여, 항체-약물 접합체를 형성시키는 단계
를 포함하는, 제1항의 접합체를 제조하는 방법.
청구항 30
제29항에 있어서, 접합체의 접합 효율이 적어도 약 51％인 방법.
청구항 31
제29항에 있어서, 트랜스글루타미나제가 미생물 트랜스글루타미나제, 정제된 트랜스글루타미나제, 또는 조작된
트랜스글루타미나제인 방법.
청구항 32
제29항에 있어서, 접합체가 크로마토그래피 단계에 의해 정제되는 정제 단계를 추가로 포함하는 방법.
발명의 설명
기 술 분 야
관련 출원에 대한 교차-참조[0001]
본 출원은 미국 가출원 번호 61/984,645 (2014년 4월 25일 출원), 62/028,731 (2014년 7월 24일 출원),[0002]
62/103,999 (2015년 1월 15일 출원), 및 62/147,293 (2015년 4월 14일 출원)을 우선권 주장하고, 이들 모두는
공개특허 10-2016-0145790
- 6 -
이에 의해 전문이 참고로 포함된다.
서열 목록에 대한 참조[0003]
본 출원은 EFS-Web을 통해 전자 출원되고, .txt 양식의 전자 제출된 서열 목록을 포함한다. 이러한 .txt 파일[0004]
은 2015년 4월 9일에 생성되고 크기가 9 KB인 파일명 "PC7207805SEQLISTING_ST25.txt"의 서열 목록을
함유한다. 이러한 .txt 파일에 함유된 서열 목록은 명세서의 일부이고, 전문이 본원에 참고로 포함된다.
분야[0005]
일반적으로 본 발명은 1) 글루타민-함유 태그, 내인성 글루타민, 및/또는 항체 조작 또는 조작된 트랜스글루타[0006]
미나제 (예를 들어, 기질 특이성이 변경됨)에 의해 반응성이게 만들어진 내인성 글루타민; 및 2) 아민 공여체
단위, 링커 및 작용제 모이어티를 포함하는 아민 공여체 작용제를 포함하는, 약물-항체 비 (DAR)가 높은 트랜스
글루타미나제-매개 항체-약물 접합체에 관한 것이다. 또한 본 발명은 이같은 항체-약물 접합체의 제조 방법 및
사용 방법에 관한 것이다.
배 경 기 술
배경[0007]
항체 요법은 다양한 장애, 예컨대 암 및 면역학적 질환에 걸린 환자에서 표적화된 치료적 처치를 제공하고, 따[0008]
라서 생물학적 연구에서 중요한 역할을 해왔다. 항체-약물 접합체 (ADC)를 포함하는, 표적화된 항체 요법의 여
러 접근법이 탐구되었다. 예를 들어, 문헌 [Doronina et al., Bioconj. Chem. 19:1960-1963 (2008)]; 및
[Junutula et al., Nat. Biotechnol. 26: 925-932 (2008)]을 참조한다.
항체-약물 접합체 (즉, 면역접합체)의 경우, 일반적으로 세포독성 소형 분자 (약물)가 약물 모이어티의 종양으[0009]
로의 표적화된 국소 전달을 위해 항체에 연결 또는 접합된다. ADC를 위한 통상적인 접합 방법은 리신 측쇄 아
민을 통한 또는 쇄간 디술피드 결합을 환원시킴으로써 활성화된 시스테인 술프히드릴 기를 통한 화학적 변형을
포함한다. 애드세트리스(ADCETRIS)
®
(브렌툭시맙 베도틴) 및 캐싸일라(KADCYLA)
®
(아도-트라스투주맙 엠탄
신)은 이러한 통상적인 방법을 사용하는 ADC의 2가지 예이다. 예를 들어, 문헌 [Tanaka et al, FEBS Letters
579:2092-2096 (2005)]; 및 [Strop, Bioconj. Chem., (in press) (2014)]을 참조한다. 통상적인 ADC 접합 방
법은 안전성 프로파일, 효능 및 소거율이 가변적인, 다양한 개수의 약물이 비-특이적 위치에서 부착된 비균질
혼합물이 산출되는 경향이 있다. 예를 들어, 문헌 [Wang et al., Protein Sci. 14: 2436-2446 (2005); 및
[Firer and Gellerman, J. of Hematology

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